BL21(DE3)感受态细胞

BL21(DE3)感受态细胞

  一、产品编号:CB101

  二、储存条件:-80℃保存

  三、有效期:6个月

        四、产品规格

产品名称 目录号 规格
BL21(DE3) 感受态细胞 CB101-01 5×100 uL
BL21(DE3) 感受态细胞 CB101-02 10×100 uL
BL21(DE3) 感受态细胞 CB101-03 20×100 uL

  五、产品组成:

本产品组成 CB101-01 CB101-02 CB101-03
BL21(DE3) 5×100 uL 10×100 uL 20×100 uL
pUC19阳性质粒 10 uL 10 uL 10 uL

  六、产品说明:

  金思德-BL21(DE3)感受态细胞采用特殊工艺处理获得的感受态细胞,可用于DNA的化学转化。经pUC19质粒检测,转化效率高达107cfu/μg DNA以上。

  七、基因型:

  F-, ompT, hsdSB(rB-mB-),gal,dcm(DE3) 。

  八、产品特点:

  该菌株用以T7 RNA聚合酶为表达系统的高效外源基因的蛋白表达宿主。T7噬菌体RNA聚合酶基因的表达受控于λ噬菌体DE3区的lacUV5启动子,该区整合于BL21的染色体上。该菌适合于非毒性蛋白的表达。

  九、使用步骤:

  注:一次转化感受态细胞建议用量为50~100 uL; 以下操作请在无菌条件下进行。

  1、取适量感受态细胞置于冰浴中,融化后加入目的DNA,轻轻混匀,冰浴30 min;

  2、42℃水浴热激60~90 s,然后快速转移到冰浴中,冰浴2-3分钟,该过程不要摇动离心管;

  3、向每个离心管中加入500 uL无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃,200 rpm的摇床培养1小时,使菌体复苏;

  4、将离心管内容物混匀,根据试验要求(质粒、重组载体),吸取不同体积已转化的感受态细胞加入到含抗生素的LB固体琼脂板上,均匀涂开;

  5、将平板置于室温直至液体被吸收后再倒置,37℃培养箱中培养12~16小时。

  十、注意事项:

  1、避免反复化冻;

  2、实验应在无菌条件下操作;

  3、操作过程要轻柔。

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